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荧光倒置显微镜 太震慑了:荧光显微镜下的胎儿肺这么美!

来源:网络 2021年04月17日 17:12   作者:fashion 荧光倒置显微镜 胎儿 标本

胎儿的肺部长啥样?其形状和外观在胎儿期内是怎么发育和改变的?信任很多人都会对这些问题感到生疏和猎奇。

美国旧金山市加利福尼亚大学泌尿外科的 Baskin 等,使用光片荧光显微镜(LSFM)成像技能对上述问题进行了调查研讨,并经过令人震慑的精美图片和视频,直观展现了胎儿肺的外观与绮丽,文章宣布在近期的 AJRCCM 杂志上。

胎儿肺何时构成、怎么获取?

胎儿发育的第 7~16 周,对应于其肺部发育的假腺管型阶段。其间,胎儿肺的传输气道经过二叉分枝 ( dichotomous branching ) 式的重复增殖而逐步构成。这种增殖分解也是肺上皮细胞与其周围间质细胞之间相互作用的成果。

研讨者所描绘的人胎肺是经相关道德委员会(IRB)同意后,经过挑选的确诊性刮宫术所获取。依据胎儿足部的跟-趾长度,其胎龄估量为 9.5 周。运用 4% 的多聚甲醛固定后,将标本包埋于丙烯酰胺水凝胶基质内,并使用被迫清晰度技能(PACT)使之透明化。

这以后,将上述标本先后浸泡于抗碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体和荧光偶联抗体中。其间,bFGF 抗体是呼吸道上皮细胞发育的一种标志物。

最终,研讨者将标本包埋于低熔点琼脂糖中,使用耐熔折射率匹配液使之平衡到 n = 1.46。经过 Lightsheet Z.1 显微镜(德国 Carl Zeiss 股份公司出产)对标本进行成像处理,并使用 Imaris 体系(瑞士 Bitplane 股份公司出产)进行三维模型重建。

胎儿肺成像揭秘!

研讨者获得的胎儿肺图画显现,其肺部假腺上皮管经过显着的二叉分枝方法,构成了一、二、三级支气管。该时期的肺发育还会持续更多周,并逐步构成成人腺泡型气道的数量和散布形式。


图 1 抗碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)染色的 9.5 周胎儿肺标本的片光荧光显微镜(LSFM)图画:(A)为前面观,(B)为肺门层面。108x66 mm (600 x 600 DPI)。LSFM 成像技能可在亚细胞分辨率水平调查前腺泡气道的支气管及其二叉分枝的形状发作。

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